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2022
12-28背景資料C反應蛋白(C-reactiveprotein,CRP)是相對分子質(zhì)量(115-140)×103的血清β球蛋白,是由5個相同的亞單位以非共價鍵結(jié)合而成的環(huán)狀五球體,這一特征性結(jié)構(gòu)使其歸類于五聚素(一組具有免疫防御特性的鈣結(jié)合蛋白)家族。低等動物同樣存在CRP,如在鱟、河蚌等中也發(fā)現(xiàn)過,但并不一定起急性期反應蛋白的作用。CRP特征反應是能在鈣離子存在的條件下特異性結(jié)合磷酸膽堿基團。CRP在人的血清、CSF、胸腹水等多種體液中均可被檢測。臨床意義CRP作為炎癥標志物,對于...
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12-28背景資料半胱氨酸蛋白酶抑制劑C(CystatinC,Cys-C),又名胱抑素C,廣泛存在于各種組織的有核細胞和體液中,是一種低分子量、堿性非糖化蛋白質(zhì),分子量為13.3KD,由122個氨基酸殘基組成,可由機體所有有核細胞產(chǎn)生,產(chǎn)生率恒定。循環(huán)中的Cys-C僅經(jīng)腎小球濾過而被清除,是一種反映腎小球濾過率變化的內(nèi)源性標志物,并在近曲小管重吸收,但重吸收后被代謝分解,不返回血液,因此,其血中濃度由腎小球濾過決定,而不依賴任何外來因素,如性別、年齡、飲食的影響,是一種反映腎小球濾過率...
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12-23流式細胞檢測技術(shù)是一種對液流中排成單列的細胞或其它生物微粒(如微球,細菌,小型模式生物等)逐個進行快速定性、定量分析和分選的技術(shù)。該技術(shù)廣泛的運用于從基礎研究到臨床實踐的各個方面,涵蓋了細胞生物學、免疫學、血液學、腫瘤學、藥理學、遺傳學及臨床檢驗等領(lǐng)域??蓹z測培養(yǎng)細胞、組織樣本、分離細胞等,其檢測結(jié)果以直方圖、二維圖或假三維圖表示,用于檢測免疫表型分析(白血病、淋巴瘤、干細胞、疾病診斷、藥物評價)、DNA含量及細胞周期分析、細胞特異性標記物、細胞凋亡研究、基因轉(zhuǎn)染鑒定等方面。...
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12-16目前有多種蛋白標記技術(shù)來幫助我們研究感興趣的蛋白質(zhì)的豐度、位置、相互作用、翻譯后修飾、功能,乃至監(jiān)測活細胞中的蛋白質(zhì)運輸?shù)葐栴}。目前有多種類型的標記物和標記方式可供選擇,但是針對特定的應用應當選擇適合的標記策略。代謝標記策略代謝標記策略是一種體內(nèi)標記方法,在這種方法中,細胞被“喂養(yǎng)”了化學標記的營養(yǎng)物,然后這些標記物被摻入新合成的蛋白質(zhì)、核酸或代謝物中。然后,我們可以收集細胞并分離這些分子以獲得細胞生物過程的全局視圖。蛋白同位素標記原理:蛋白同位素標記是一種經(jīng)典的蛋白示蹤和蛋...
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12-9(一)獲得目的基因1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設計一對引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。(二)構(gòu)建重組表達載體1、熒光素標記的生物素載體酶切:將表達質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點)進行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載...
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12-8蘇木精是從熱帶植物蘇木中提取的一種色素,蘇木精不能直接染色,必須暴露在空氣中變成氧化蘇木精(又叫蘇木素)-“成熟"后才能使用。蘇木素和伊紅在組織學上被經(jīng)常使用,與碘液不同,這是一種染色劑。其他常用的含有蘇木素的染色劑有磷鎢酸蘇木素染色劑,也就是磷鎢酸與蘇木素的混合物。蘇木素染色劑經(jīng)常為組織的研究使用。明礬和三價鐵鹽常常被用作媒染劑,展示核和細胞質(zhì)結(jié)構(gòu)。這些媒染劑的原理都是形成媒染劑-染料-組織復合體,從而顯示顏色。使用的鹽不同顏色也不同:當用鐵鹽呈現(xiàn)深藍色顏色沉淀,用鋁鹽通常...
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12-2背景資料人絨毛膜促性腺激素(HumanChorionicGonadotropin,HCG)是由胎盤的滋養(yǎng)層細胞分泌的一種糖蛋白,由α和β兩個亞基組成的異源二聚體。α亞基與垂體分泌的黃體生產(chǎn)素(LH)、促卵泡激素(FSH)和促甲狀腺激素(TSH)相似,β-亞基是HCG所特異的結(jié)構(gòu)。HCG的主要功能是刺激黃體,有利于雌激素和黃體酮的持續(xù)分泌,促進子宮蛻膜的形成,使胎盤生長成熟。受精卵在子宮內(nèi)著床后,由胚胎發(fā)育為胎兒的過程中,胎盤的滋養(yǎng)層細胞產(chǎn)生大量的HCG,HCG可通過血液循環(huán)排...
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12-2背景資料促黃體激素(Luteinizinghormone,LH)也叫黃體生成素、促間質(zhì)細胞激素,是腺垂體前葉細胞分泌的一種糖蛋白類促性腺激素,由α和β兩條多肽組成的異源二聚體,存在于人的血液和尿液中。對于女性來說,LH與促卵泡刺激素(FSH)共同作用促進卵泡成熟與排卵,使卵泡破裂形成黃體,并分泌雌激素和孕激素。LH的產(chǎn)生受下丘腦促性腺釋放激素的控制,同時受卵巢的正、負反饋調(diào)控。對于男性來說,LH的作用是促進睪丸間質(zhì)細胞的發(fā)育及睪酮的分泌。男性LH的正常值為1.24-8.62m...
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